人生长激素检测试剂盒（酶联免疫法）

通用名称：人生长激素检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名称：HGH (Human Growth Hormone)

【产品规格】96T

【预期用途】试剂盒可用于人血清中HGH的定量检测。

【前言简介】

人生长激素（HGH）是垂体前叶分泌的一种多肽，191个氨基酸长，分子量大概为22KD。它的代谢影响主要是合成代谢。HGH促进蛋白质的储存并参加蛋白质的合成过程。它也可以提高葡萄糖的转运并促进糖原的储存。生长激素促进生长发育的作用会受到另一类生多肽激素（生长调节素）的影响。HGH的测量主要有意于各种形式的生长激素分泌异常疾病的诊断与治疗。生长激素分泌不足会形成呆小症，而生长激素分泌过多则会形成巨人症和支端肥大症，所以我们应当对生长激素的临床影响给予高度重视。因为生长激素在一天中会不断的变化，使得我们很难确定它的正常值，或者说根据单一的检测很难确定一个个体生长激素的水平。有很多我们知道的因素都会影响生长激素的分泌速度，这些因素包括：睡眠和失眠的周期、运动、压力、低血糖、雌激素、皮质类固醇和左旋多巴。因为生长激素与催乳素、胎盘泌乳素的相似性，所以孕妇和分泌乳汁女性生长激素的早期检测错误率都很高。并不是所有支端肥大症患者的生长激素水平都会提高，因此根据葡萄糖合成而形成的抑制测试会有利于支端肥大症的检测。尽管会出现高血糖症，但支端肥大症患者血糖水平几乎不会上升。生长激素缺陷个体与正常人群一样，他们有相似的禁食和休息水平。因此人们设计了各种挑战性测试以便能将他们区分开来。例如，在熟睡一开始或激烈运动15至20分钟后，生长激素的水平在正常情况下都会上升。生长激素反应性的其它检测都在服用L-多巴氨、精氨酸和胰岛素后进行的。 为了加速生长激素的反应性，我们将心得安或雌激素与原刺激物一起使用。据文献显示，少数侏儒症的HGH基本水平和挑战性检测反应都是正常的。这种病例的组织可能对生长激素或生长调节素或有免疫活性但生物学上是无活性的生长激素不敏感。人生长激素酶免检测是一种快速、灵敏并且可靠的检测方法。并且此试剂与HCG、TSH、LH、FSH和催乳素之间无交叉反应。

【检测原理】

试剂盒利用的是固相酶联免疫吸附的方法。此检测系统利用羊抗HGH抗体作为固相，辣根过氧酶标记的鼠单克隆抗体作为酶联物。检测样品可同时与这两种抗体反应，结果HGH分子就夹在固相和酶联抗体之间。室温下温育45分钟后，用蒸馏水洗板以除去未结合的酶标抗体。加入TMB底物液再温育20min，之后溶液会显现出蓝色。加入终止液以终止显色反应，之后溶液由蓝色边成黄色，酶标仪上450nm处读取OD值。样品中HGH的浓度直接与所显示颜色强度成正比。

【试剂盒组成成分】

微孔板 12×8 包被有羊抗HGH抗体

标准品 6×1ml 即用型 浓度：0、2.5、5、10、25、50ng/ml HGH

酶联物 1×13ml 含HRP标记的鼠抗HGH单克隆抗体

底物液 1×11ml 含TMB

终止液 1×11ml 含已稀释的盐酸

【储存条件】

未开封的试剂盒应当储存于2-8℃的环境下，微孔板应当保存在含干燥剂的密封袋中，使其接触潮湿空气的程度减小到最小。假如开封了的试剂按上述方式储存，则它在有效期内稳定。

【检测方法】

实验开始前应当将所有的试剂都平衡至室温（18-25℃）

检测步骤

1) 将所需数量的板条固定到板架上。

2) 将标准品、质控品和样品分别用新的取样吸头取50μL加入到相应的微孔中。

3) 在每一微孔中加入100μL酶联物。

4) 充分混匀30秒，在这个步骤完全混匀很重要。

5) 室温（18-25℃）孵育45分种。

6) 快速弃取孔内反应物

7) 用蒸馏水或去离子水洗板5次（请不要使用自来水）

8) 在吸水纸上拍干。

9) 在每一微孔中加入100μl底物液，混合5秒。

10) 室温下，避光温育20分种。

11) 加100μl终止液到每个检测孔中终止酶反应。

12) 充分混合30秒，确保溶液颜色完全变成黄色。

13) 加终止液后15分钟之内，用酶标仪在450±10nm处测定OD 值。

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