主眼与副眼的区别主要体现在视觉习惯、卡洞法、手指法、Worth四点灯法、实际应用测试来进行区分。

1、视觉习惯：主眼是更习惯使用的那只眼睛，在观察、注视和观测等方面起到主导作用。副眼则相对较少使用，其在某些特定情况下起到辅助作用。

2、卡洞法：通过卡洞法测试，观察远处物体。遮盖一只眼，如果另一只眼看不到物体，则被遮盖眼为主导眼，睁着的眼睛为非主导眼。验证方法是遮盖另一只眼进行测试。

3、手指法：选择一个远处合适的目标，双眼正视目标。伸直胳膊，用大拇指遮住目标。闭一只眼睛看目标，若目标偏离过大，说明闭着的眼睛为主导眼，睁开的眼睛为非主导眼。

4、Worth四点灯法：戴红绿眼镜或红绿镜片，注视33cm和6m处的四点灯。看到四个灯为双眼单视功能正常，看到两个红灯、两个绿灯或三个绿灯、一个红灯则为主导眼。

5、实际应用测试：进行一些需要单眼观察的任务，如使用相机取景、投飞镖等。观察在这些活动中更习惯使用哪只眼睛。长时间习惯使用的那只眼很可能是主眼。

需要注意的是，有些人可能并没有明显的主眼或副眼，这种情况被称为双眼视觉优势，个体在进行视觉任务时两只眼睛都能正常协调工作。