Pet32a载体和Pet28a载体质粒区别❗️❗️
✅区别不大
✅pET系列骨架都一样
❗️❗️主要是区别：
?原件
?标签
?酶切位点不一样
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?【pET-32a质粒】是一种原核表达载体
?C端含有一个6×His标签
?N端含有一个thrombin位点、6×His标签、TrXA位点、Ek位点和S标签
?该质粒含有多个常用的酶切位点，便于不同基因克隆
?表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导，目的基因被克隆到质粒载体上，受噬菌体强转录及翻译信号控制。
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?【pET-28a质粒】是一种原核表达载体
?C端含有一个6×His标签，N端含有6×His标签、thrombin酶切位点、T7标签。
?该质粒含有多个常用的酶切位点，便于不同基因克隆。
?表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导，目的基因被克隆到质粒载体上，受噬菌体强转录及翻译信号控制。
?pET28a载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。
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❗️❗️注意：载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的，所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。
T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。
❗️❗️质粒的F1复制子是被定向的，所以在T7噬菌体聚合酶的作用下，包含有蛋白编码序列的病毒粒子能够产生，并启动蛋白表达，同时蛋白表达将被T7终止子序列的作用下终止蛋白翻译。
❗️❗️pET系统是有史以来在大肠杆菌中表达重组蛋白的功能最强大的系统，也是现今原核表达方面使用最广泛的系统。
❗️❗️该系列质粒能很容易的通过降低诱导物的浓度来削弱蛋白表达。
❗️❗️在非诱导条件下，可以使目的基因处于完全沉默状态而不转录。
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