血涂片的制备与染色
➢实验目的
掌握血涂片的制备和染色方法
--------------------------------------
➢实验材料、仪器与试剂
1. 实验材料：载玻片：使用前,必须仔细清洗,并用乙醇或软布清洁。酒精灯、采血针、无菌脱脂棉
2. 实验试剂：(1) 瑞氏(Wright)染液(2)II液:磷酸盐缓冲液(pH6.4-6.8)
--------------------------------------
➢实验方法与步骤
1.采血皮肤采血法:选择第三、四手指,采血1滴置洁净玻片上用于血涂片制备（2-3ul）。
2. 制作涂片左手平执载玻片,或放在类似桌子等平坦地方,右手持推片从后方移动接近血滴,使血液沿推片边缘展开,将推片与载玻片呈30◦-40◦角,用均匀速度向前将血液推成厚薄适宜的血涂片血涂片应呈舌状,头、体、尾三部分,且清晰可见。所有血液必须在推片到达末端前用完。p6
3. 干燥涂片空气干燥:将推好的血涂片在空气中晃动,使其迅速干燥。
4. 标记涂片在载玻片的一端用记号笔编号。
5. 染色瑞氏染色法:待血涂片干透后,将玻片平置于染色架上,滴加染液(I液)3-5滴,使其迅速盖满血涂片,约0.5-1min后,滴加等量或稍多的缓冲液(II液),轻轻摇动玻片使染液充分混合。5min后用流水冲去染液,待干。
6. 观察结果将干燥后的血涂片置显微镜下观察，用低倍镜观察血涂片体、尾交界处的血细胞。p7.8 p8是倒数第二片，也就是最短的那片，可见并没有涂开，细胞都重叠在一起。
最后在另一片里数了一百个白细胞