抗菌药物评价(二)
牛津杯法:也称为毒力玻璃管或药敏试验杯。具体操作是在一定浓度的抗生素溶液中将牛津杯浸泡,使其吸收一定量的抗生素。然后将带菌液均匀涂于固体培养基上,将经过抗生素处理的牛津杯倒置于培养基上,置于恒温箱中孵育。若细菌对抗生素不敏感,则在牛津杯周围形成一个清晰的生长区域;若细菌对抗生素敏感,则在牛津杯周围形成一个明显的抑菌圈。
纸片扩散(Kirby-Bauer)法和牛津杯均为定性分析方法,不能直接测量药物最小抑菌浓度(MIC)。但这些方法广泛用于临床微生物学和药物研发领域中,是快速、简便、可靠的筛选工具。
此外,在纸片扩散法的基础上进一步衍生出来的E-test法。
E-test法:利用药物梯度滤纸片,用于测定细菌对特定抗生素的敏感性和MIC。
需要注意的是,E-test具有操作简便、结果明显、数据可靠等优点,但其也存在一些局限性,例如药物梯度滤纸片无法快速制备,无法测量杀菌效果。因此,在使用E-test进行药物评价时,需要结合其他检测方法进行综合分析。
其步骤如下:
1.将含有营养物质的琼脂平板铺平,并选取待检菌株斑点接种在琼脂平板上。
2.从E-test试纸带中剪下一段试纸,将其放置在琼脂平板上与菌斑相切合,并轻轻压实确保试纸与琼脂平板充分接触。
3.将琼脂平板放入培养箱中,在适当的温度和气氛下孵育。
4.观察并记录试纸上出现的椭圆形药物抑制区直径,并结合参考表确定最小抑菌浓度(MIC)值。
最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)和最小杀菌浓度(Minimum Bactericidal Concentration)法:是最常见的抗微生物药物评价方法之一。该方法通过测定药物在不同浓度下对目标微生物的最小抑菌和杀菌浓度浓度,来评估药物的抗菌活性。优点是易于操作和解释结果,快速了解有一药物的抗菌谱,但不能考虑药物的时间依赖性和浓度依赖性。